- 一、大鼠小鼠海马侧脑室脑立体定位注射AAv腺病毒慢病毒实验外包服务实验:
1. 了解脑立体定位注射实验技术。
二、专业大鼠小鼠海马侧脑室脑立体定位注射AAv腺病毒慢病毒实验外包服务实验原理 三、海马侧脑室脑立体定位注射AAv病毒实验外包服务实验器材 四、海马侧脑室脑立体定位注射AAv病毒实验外包服务实验步骤 1.1 校验仪器
(1)将两侧耳杆柱旋松,在主框上前后滑动,然后再按照原规定刻度装好,看两侧耳杆尖是否完全对正。
(3)然后再用水平尺调正好两个滑道的前后、左右水平。这时再把安置在滑道上的手动微推进器按上面的刻度调节垂直。
(1) 用耳间线中心定位,首先将两个耳棒尖端在定位仪滑道中间部位彼此相接触(两个耳棒读数相同),旋紧镙丝。然后取下一侧耳棒,另一耳棒不动。调节移动推进器,使校验电极尖端与耳棒尖端的中心点相触,即为A点(即耳间线中心点),并记下刻度值。然后,将推进器水平移动到门齿钩的上方,将门齿钩平面与校验电极尖端相触。这时就定出外耳道中心点与门齿牙板上面上沿之间的水平切面0点,记为H0。这时,动物的前囟和后囟基本处在一个水平面上,相差0-0.1mm。另外,规定耳间线中心点以上为+,向下为-;向嘴侧为+,向尾侧为-。
2. 海马侧脑室脑立体定位注射AAv病毒实验外包服务实验内容 (2)小鼠头部固定:将小鼠的门齿固定于脑定位仪上颌固定器,然后把一侧的耳捧推入动物的外道后,使动物的头在处于两滑道正中。再将另一耳捧推入另一侧的外耳道。这时观察两个耳棒的刻度一致后,将两耳棒上的固定螺丝扭紧,在将牙齿固定器上压鼻环压下后扭紧(鼻环、耳棒的松紧度调节适宜为好),这时从各个方向推压动物头部"均不会出现移动。
(4)确定标准中线:将金属定位针向下移动到矢状缝上方后,再前后移动定位针,使定位针定位到前囟。
(6)注射药物:小鼠海马则位于该圆孔下2 mm,将1ml注射器吸入药物安置到MC-5微操作仪上,操作仪器使注射器针头由小鼠脑钻孔处下降2mm时完成药物注射到小鼠脑海马处。
(7)制作脑组织切片:将小鼠脑制作成切片,显微观察小鼠脑中红染料位置来验证小鼠脑海马中是否定位准确。