【取材组织固定包埋切片双重多标荧光染色扫描病理实验外包服务】
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包埋切片HE染色实验具体步骤
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 Servicebio
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
HE染液 servicebio G1005
分化液 servicebio G1005-3
返蓝液 servicebio G1005-4
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、苏木素染色:切片入苏木素染液染3-5min,自来水洗,分化液分化,自来水洗,返蓝液返蓝,流水冲洗。
3、伊红染色:切片依次入85%、95%的梯度酒精脱水各5min,入伊红染液中染色5min。
4、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲Ⅰ5min-
二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
5、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:
细胞核呈蓝色,细胞质呈红色。
四、注意事项:
1、注意细胞核的分化程度;
2、注意苏木素和伊红的效价,及时更换染液。
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